一、生物透射電鏡服務具體步驟
需求溝通與評估
客戶與透射電鏡測試機構進行在線或電話咨詢,明確具體的檢測需求和目標。
機構專業人員根據客戶需求提供詳細的檢測方案和建議,并進行樣品評估,確保樣品適合進行透射電鏡觀察。
樣品準備
取材:快速、準確地從生物體中取材,組織塊大小一般控制在1mm³左右,確保樣品新鮮且無污染。
固定:采用戊二醛等固定劑對樣品進行固定,保護樣品結構,防止自溶和降解。固定時間根據樣品特性而定,通常需固定數小時至過夜。
脫水:使用逐級濃度的酒精或丙酮對樣品進行脫水處理,確保樣品脫水,便于后續包埋。
包埋:將脫水后的樣品包埋于樹脂等包埋劑中,通過聚合反應使包埋劑固化,形成適合切片的樣品塊。
超薄切片
使用超薄切片機將包埋好的樣品塊切成厚度約為50-100nm的超薄切片。切片過程需精細操作,避免切片破損或變形。
染色
對超薄切片進行重金屬離子染色(如鈾鹽和鉛鹽),增強樣品結構的電子散射能力,提高圖像對比度。
電鏡觀察與圖像采集
將染色后的超薄切片放入透射電鏡中,調整電鏡參數(如加速電壓、放大倍數等),對樣品進行觀察并采集高質量圖像數據。
圖像分析與報告出具
對采集到的電鏡圖像進行詳細的量化和分析,提取出有關樣品內部結構的關鍵信息。
根據客戶需求和目的,對分析結果進行解釋和說明,并出具詳細的檢測報告。
二、檢定過程中需要注意的事項
樣品準備質量
確保樣品在取材、固定、脫水和包埋等步驟中操作精細,避免對樣品造成機械損傷或化學污染。
嚴格控制固定和脫水時間,確保樣品結構完整且脫水。
超薄切片技術
切片過程需精細操作,確保切片厚度均勻、無破損和變形。
使用高質量的超薄切片機和切片刀,提高切片質量和效率。
染色效果
染色過程需嚴格控制染色劑濃度和染色時間,避免染色過深或過淺影響圖像質量。
染色后需充分清洗切片以去除多余染色劑。
電鏡操作環境
保持電鏡操作環境清潔無塵、無震動、無電磁干擾,確保電鏡穩定運行和圖像質量。
定期清潔和維護電鏡設備,延長設備使用壽命并提高觀測效果。
參數設置與校準
根據樣品特性和觀察需求合理設置電鏡參數(如加速電壓、放大倍數等)。
在觀察前進行必要的校準操作(如光闌校準、像散校準等),確保圖像清晰度和分辨率。
安全注意事項
操作人員需佩戴防護眼鏡和手套等個人防護裝備,避免長時間暴露在電子束輻射下。
遵守實驗室安全規程,確保設備和人員的安全。
生物透射電鏡服務涉及多個精細步驟和注意事項。只有嚴格按照操作規范進行樣品準備、切片、染色和電鏡觀察等操作,才能獲得高質量的觀測結果并確保電鏡設備的長期穩定運行。隨著技術的不斷進步和應用領域的擴展,生物透射電鏡將在生命科學研究中發揮更加重要的作用。